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实验室的菌种保存

更新时间:2022-11-03   点击次数:684次

菌种的保存方式取决于菌种的特性,不同的菌种有不同的保存方式。在普通实验室 使用方法&最&方便。只需-60〜-85℃的冰箱即可:

琼脂斜面菌种

许多菌株都能在琼脂斜面上保存(如营养琼脂、麦芽抽提汁琼脂),不同的菌株选用不 同的培养基。琼脂斜面能在试管中或螺帽瓶屮制作,后者可以防止培养基干燥。菌株一 旦生长,就要避光保存在室温或冰箱中,但必须根据不同的菌株类型,以一个月至两年的 间隔进行转接

乳酸菌的保存

乳酸菌不适合在有氧的固体培养基表面生长,适合在液体培养基中保存(如酵母糖白垩石蕊乳或Robertson疱肉培养苯),2〜4个月转接一次。含有牛奶或糖的培养基要加入白垩以防止培养基的pH过低。在酵母糖白垩石蕊乳的凝结奶层中的细菌死亡后,白垩 沉淀中仍有活菌株存在。

厌氧菌的保存

厌氧菌不能在有氧的间体培养基表面生长,只能在氧气较少的环境下生长,菌种最长要每一年转接一次‘

-60~-85℃玻璃珠保存法

该方法可以对菌株连续保存,非常实用,例如为生化测试提供已知的阳性和阴性菌 株。但与冻干保存比较,该方法在资金和能源上的消耗较大。将直径2〜4mm的玻璃珠 分装到小螺帽瓶中(每瓶最多装30粒),高压灭菌。将菌株加人到培养基悬液中制成混悬 液。采用无菌操作将混悬液转人有玻璃珠的无菌瓶中。搅动混悬液包被玻璃珠,用无菌 的移液管将多余的悬液移走。对螺帽瓶标记后放入有分隔的-60~-85℃箱中保存。 使用不同颜色的玻璃徠有助于菌株的辨别,建议建立菌种保存目录,以减少取出菌种时 冰箱的开门时间、使用时只需取出一粒玻璃珠,放入含有所需培养基的试管或培养瓶中 培养。在常规的液体培养基一般需氧菌为营养肉汤,厌氧菌为强化梭状芽孢杆菌培养基 ,嗜盐菌为加盐哲养肉场培养基]中混入15%的甘油得到需要的悬液培养基。整 套保存系统在市场上有售

油保存法

将经过琼腊斜面培养或穿刺培养后的菌株用已灭菌的石蜡或矿物油全部覆盖[将待 灭菌的石蜡少量分装到三角瓶中(注不要装得太多,以免灭菌不彻&底),然后 在160℃干燥箱中灭菌1〜2h。用这种方法保存的菡种可以保存几年不用转接。尽管 Onions及其同事认为采用该方法保存的一批真菌会产生非典型菌落,但对于小真菌来 说,这仍是一种非常适合的保存方法。

冻干保存法

该方法是将菌种冻干后保存在密封的真空安瓿瓶中,安瓿瓶可放在室温或冰箱中保 存。这样保存的菌种能够存活许多年。这种方式特别适用于菌种的储藏和运输。